首页 > 文献资料
-
PDZK1基因过表达对宫颈癌HeLa细胞生物学行为的作用
[目的]通过上调PDZ结构域蛋白1(PDZ domain containing 1,PDZK1)基因表达,探讨PDZK1基因对宫颈癌HeLa细胞生物学行为的调控作用.[方法]将PDZK1表达质粒和空载体质粒分别转染HeLa宫颈癌细胞,经G418筛选及Western印迹验证,获得整合了PDZK1及空载体的稳转HeLa细胞.CCK-8法检测两种细胞增殖活性、软琼脂集落形成实验检测细胞锚定非依赖生长能力、Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率、Transwell迁移实验检测细胞迁移能力.[结果]与整合空载体的HeLa细胞相比,PDZK1过表达可显著抑制HeLa细胞增殖能力(第5天P=0.001,第6、7天P＜0.001),同时降低HeLa细胞锚定非依赖生长能力[(1.67±0.58)和(3.67±0.58)],差异有统计学意义(t=4.243,P=0.013).相比整合了空载体的HeLa细胞,PDZK1过表达可以促进HeLa细胞凋亡[(4.70±0.56)％和(1.40±0.10)％],差异有统计学意义(t=-10.014,P=-0.001).此外,整合PDZK1的HeLa细胞其迁移能力(21.33±4.16)显著低于整合空载体的HeLa细胞(52.33±6.02),差异有统计学意义(t=--7.392,P=0.002).[结论]上调PDZK1基因表达可以抑制宫颈癌HeLa细胞增殖和迁移,并促进其凋亡.
-
过表达SLC9A3R1对MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖的影响
目的 探讨SLC9A3R1在MDA-MB-231乳腺癌细胞中过表达后,对其恶性表型是否具有逆转作用.方法 将pBK-CMV-HA和pBK-CMV-HA-SLC9A3Rlwt质粒转染不表达SLC9A3R1的人MDA-MB-231乳腺癌细胞,经G418筛选,建立稳定高表达SLC9A3R1的MDA-MB-231细胞系.经Western blot法验证后,采用CCK-8试剂盒检测肿瘤细胞增殖活性,采用软琼脂集落形成方法检测SLC9A3R1对MDA-MB-231细胞形成集落能力的影响,并采用流式细胞仪检测SLC9A3R1对MDA-MB-231细胞凋亡的影响.结果 SLC9A3R1可使MDA-MB-231细胞的增殖能力明显减弱,达50％以上(第5天P=0.0016,第6天P=0.002,第7天P=0.006).相比MDA-MB-231细胞和整合了空载体的细胞,SLC9A3R1过表达可使MDA-MB-231细胞系锚定无关的增殖能力明显减弱[(2.9±0.47)％、(2.52±0.08)％和(1.33±0.33)％],达47％(P=0.007).相比整合了空载体的MDA-MB-231细胞,SLC9A3R1过表达可使MDA-MB-231细胞系凋亡百分比明显增多[(2.23±1.41)％和(9.23±2.97)％],达4倍以上(P=0.018).结论 SLC9A3R1可抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞的增殖和迁移能力.
