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马蓝叶中β-葡萄糖苷酶的提取及酶学性质的研究
目的 建立pNPG法测定马蓝叶中β-葡萄糖苷酶的活性,研究马蓝叶中β-葡萄糖苷酶的基本酶学性质,为进一步阐明青黛炮制原理提供依据.方法 采用pNPG法考察马蓝叶中β-葡萄糖苷酶活性测定的佳条件.结果 适反应条件为总反应体积1 mL,反应时间45 min,底物pNPG体积0.2 mL,浓度25 mmol/L,缓冲液pH值6,反应温度55℃.在此条件下研究马蓝叶的粗酶液中β-葡萄糖苷酶的基本酶学性质,结果表明该酶在30～60℃热稳定性较差.该酶在pH5.0～7.0比较稳定,而在酸性条件下酶活下降较快,酶的pH值稳定性范围较窄.酶在4℃下的保存稳定性较好.结论 确定了测定马蓝叶中β-葡萄糖苷酶活性的佳条件,探索了马蓝叶中β-葡萄糖苷酶的酶学性质,该酶的热稳定性、pH值稳定性和保存稳定性的研究为青黛炮制原理的研究奠定了理论依据.
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亳菊花中β-葡萄糖苷酶的提取和酶学性质研究
目的 测定亳菊花中p葡萄糖苷酶的活性,研究亳菊花中β-葡萄糖苷酶的基本酶学性质.方法 采用对硝基苯酚-β-D葡萄糖苷(4-nitrophenyl-β-D-glucopyranoside,pNPG)法考察亳菊花中β-葡萄糖苷酶活性测定的佳条件及其酶学性质.结果 当0.2mL酶液、20 mmol/L pNPG 0.2 mL、0.6 mL pH值为4.0的柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液在温度为50℃的水浴中反应45 min时,酶活性高.在此条件下对亳菊花的粗酶液中β-葡萄糖苷酶的基本酶学性质进行初步研究,结果表明该酶在30～50℃时,随着温度升高,酶活力有上升趋势,其热稳定性较好;pH值在3.2～5.4之间时,相对酶活性均在80％以上;酶在4℃下的保存稳定性较好.结论 本研究所测定的亳菊花中β-葡萄糖苷酶活性的佳条件及酶学性质可为亳菊花炮制原理研究奠定基础.
关键词： 亳菊花 对硝基苯酚-β-D葡萄糖苷法 β-葡萄糖苷酶活性
