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pNPG法文献资料
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马蓝叶中β-葡萄糖苷酶的提取及酶学性质的研究
目的 建立pNPG法测定马蓝叶中β-葡萄糖苷酶的活性,研究马蓝叶中β-葡萄糖苷酶的基本酶学性质,为进一步阐明青黛炮制原理提供依据.方法 采用pNPG法考察马蓝叶中β-葡萄糖苷酶活性测定的佳条件.结果 适反应条件为总反应体积1 mL,反应时间45 min,底物pNPG体积0.2 mL,浓度25 mmol/L,缓冲液pH值6,反应温度55℃.在此条件下研究马蓝叶的粗酶液中β-葡萄糖苷酶的基本酶学性质,结果表明该酶在30~60℃热稳定性较差.该酶在pH5.0~7.0比较稳定,而在酸性条件下酶活下降较快,酶的pH值稳定性范围较窄.酶在4℃下的保存稳定性较好.结论 确定了测定马蓝叶中β-葡萄糖苷酶活性的佳条件,探索了马蓝叶中β-葡萄糖苷酶的酶学性质,该酶的热稳定性、pH值稳定性和保存稳定性的研究为青黛炮制原理的研究奠定了理论依据.