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浸苗法文献资料
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利用浸苗法将野生天麻总DNA导入马铃薯的研究
目的研究野生天麻总DNA对马铃薯的转化,分析马铃薯转化植株中野生天麻的药用成分天麻素.方法采用浸苗法将野生天麻总DNA导入马铃薯试管苗,通过紫外扫描法、PCR扩增筛选转化植株,对转化植株进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)蛋白分析,通过TLC法检测天麻素.结果(1)在200株转化的马铃薯中有21株的紫外扫描图谱与正常对照组有显著差异,且在220 nm有明显吸收峰.(2)5株经PCR扩增出野生天麻抗真菌蛋白(GAFP)基因.(3)转基因马铃薯与正常马铃薯的蛋白表达有明显差异,并且在转基因马铃薯中有一条与GAFP相同的条带.而正常马铃薯中无此条带.(4)通过薄层色谱法检测出3株转基因马铃薯表达野生天麻的有效药用成分天麻素.结论采用浸苗法进行外源总DNA导入是可行的.
