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三分三文献资料
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植物表达载体在三分三发根中的高效表达
目的 建立基于发根培养的三分三Anisodus acutangulus遗传转化体系及在三分三发根中表达外源基因的方法.方法 由种子直接萌发得到无菌苗,建立了三分三的无菌苗培养系统.将植物高效表达载体pCAMBIA1304+导入经过"disarmed"改造的根癌农杆菌C58C1(携带pRiA4质粒),获得了携带外源基因表达载体的重组C58C1工程菌.取生长良好的幼嫩真叶作为外植体,在乙酰丁香酮的诱导下用重组C58C1进行感染,诱导发根.选取在无激素培养基上生长迅速,分支多的发根单克隆进行继代培养.经过3次继代培养,PCR(polymerase chain reaction,聚合酶链式反应)检测用于验证发根型质粒pRiA4和表达型质粒pCAMBIA1304+是否整合到三分三发根基因组内.结果 建立了基于发根培养的三分三遗传转化体系,发根诱导频率达到100%,PCR检测表明pRiA4和pCAMBIA1304+质粒共转化率达到32%.结论 该方法可以用于在三分三发根中高效表达外源基因,为实现基于发根的三分三产托品烷类生物碱的代谢工程奠定了基础.
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9种中草药镇痛作用的筛选实验
我们对民间常用于治疗疼痛的9种中草药,进行了小鼠镇痛作用的实验研究,现将结果报道于下.
