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川楝素提取物诱导K562细胞凋亡的实验研究
目的 探讨川楝素提取物对人白血病K562细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用及其机制.方法 采用MTT法检测川楝素提取物对K562细胞增殖的影响;Wright's染色观察细胞的形态学改变;流式细胞技术检测细胞周期与凋亡率的变化;Annexin V/PI双标记法检测细胞的早期凋亡变化;DNA琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段化;比色法检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9相对活性的改变;RT-PCR检测凋亡相关基因p21、bcr/abl、H-rasmRNA表达水平的改变.结果 川楝素提取物显著抑制K562细胞的增殖,并呈剂量-时间依赖性,作用72 h的IC_(50).值为20 nmol/L;处理组细胞可见典型的凋亡形态学改变;细胞周期和Annexin V/PI双标记检测表明川楝素提取物可诱导K562细胞凋亡,并呈剂量-时间依赖性;处理组细胞DNA琼脂糖凝胶电泳出现明显的DNA ladder;处理组细胞Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性均显著增加;p21、H-ras mRNA表达上调,bcr/abl mRNA表达下调.结论 川楝素提取物对K562细胞具有增殖抑制和诱导凋亡的作用,其机制与Caspase信号途径的活化有关.