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不同粒径纳米硒化铅对大鼠胚胎神经干细胞的氧化损伤作用
目的 探讨不同粒径纳米硒化铅(PbSe)对大鼠胚胎神经干细胞(NSCs)的氧化损伤作用.方法 将处于对数生长期的NSCs暴露于终浓度分别为0(对照)、6.25、12.5、25、50、75、100、200 μg/ml两种粒径(8、25 nm)的纳米PbSe悬液24 h,采用MTT法检测细胞存活率,采用乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞膜损伤情况.将处于对数生长期的NSCs暴露于终浓度分别为0(对照)、60、80、100μg/ml两种粒径的纳米PbSe悬液24 h,检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物还原酶(GSH-Px)活力及谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量,采用ELISA法检测细胞培养液中8-羟基-2'-脱氧鸟嘌呤核苷(8-OH-dG)的含量.结果 与对照组相比,不同浓度的两种粒径纳米PbSe暴露组NSCs细胞的存活率均降低,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着两种粒径纳米PbSe暴露浓度的升高,NSCs细胞的存活率均呈下降趋势.当纳米PbSe暴露浓度≥50μg/ml时,8 nm粒径纳米PbSe暴露组NSCs细胞的存活率均低于25 nm粒径纳米PbSe暴露组,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,不同浓度两种粒径纳米PbSe暴露组NSCs细胞培养液中的LDH活力均升高,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着两种粒径纳米PbSe暴露浓度的升高,NSCs细胞培养液中的LDH活力均呈上升趋势.在相同浓度下,8 nm粒径纳米PbSe暴露组NSCs细胞培养液中LDH的活力均高于25 nm粒径纳米PbSe暴露组,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,不同浓度两种粒径纳米PbSe暴露组NSCs细胞上清液中SOD、GSH-Px活力和GSH含量均降低,而MDA含量均升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);且随着两种粒径纳米PbSe暴露浓度的升高,NSCs细胞上清液中SOD、GSH-Px活力和GSH含量均呈下降趋势,而MDA含量均呈上升趋势.与相同浓度25 nm粒径纳米PbSe暴露组比较,各浓度8 nm粒径纳米PbSe暴露组NSCs细胞上清液中SOD、GSH-Px活力和GSH含量均降低,而MDA含量均升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,不同浓度两种粒径纳米PbSe暴露组NSCs细胞培养基中8-OH-dG的含量均升高,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着两种粒径纳米PbSe暴露浓度的升高,NSCs细胞培养基中8-OH-dG的含量均呈上升趋势.与相同浓度25 nm粒径纳米PbSe暴露组比较,80、100 μg/ml的8 nm粒径纳米PbSe暴露组NSCs细胞培养基中8-OH-dG含量均升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 纳米PbSe引起NSCs细胞的氧化损伤可能是导致其产生细胞毒性的主要原因.
