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E蛋白表达文献资料
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KN73细胞持续感染乙脑病毒的模型中变异株性状及E蛋白表达
目的研究乙脑病毒变异的特性以及变异株性状与E蛋白表达的关系.方法通过应用乙脑病毒的野生株以及人肝癌细胞KN73建立持续感染模型.采用胰蛋白酶消化技术每周进行细胞传代.经反复冻融收集持续感染细胞内病毒.采用BHK细胞空斑实验方法进行病毒滴定.采用间接免疫荧光方法检测E和NS3蛋白抗原.采用Western印迹杂交检测E和NS3蛋白的表达.结果感染早期(24小时-36小时)野生株感染的KN73细胞的培养液中病毒滴度为106 PFU/ml.在感染后期(3年)滴度为103-4 PFU/ml.病毒重叠感染实验发现在急性重叠感染野生株的持续感染KN73细胞中培养液的病毒滴度比在同一时相急性感染的正常KN73细胞培养液的滴度要低得多.间接免疫荧光检测表明,在持续感染的KN73细胞中病毒抗原的存在低于急性感染的KN73细胞.Western印迹杂交检测表明,E、NS3蛋白的分子量分别为53KD和73KD.在持续感染的KN73细胞中NS3蛋白的表达很稳定,但E蛋白的表达却明显受抑.结论从持续感染的KN73细胞中获得的病毒具有缺陷干扰病毒的一些特性且参与持续感染,其毒力和增殖均低于亲本病毒.这些变异可能与E蛋白表达减少有关.
