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RKIP基因表达上调对宫颈癌细胞生物学行为影响
目的：分析Raf激酶抑制蛋白（RKIP）基因表达上调对宫颈癌细胞生物学行为的影响。方法：将含正义（ss）RKIP cDAN真核表达载体传入宫颈癌细胞，使用Westernblot法检测传染前后细胞RKIP基因表达及其上调的稳定转染细胞系（ssRKIP），观察RKIP基因表达上调对宫颈癌细胞生物学行为的影响。结果：ssRKIP细胞、空载体pcDNA3.1（+）及为转染细胞的相对表达含量分别为2.13、1.12和1.08，转然后ssRKIP细胞的RKIP蛋白表达水平上条明显，pcDNA3.0（+）细胞的RKIP蛋白表达水平变化不明显。ssRKIP细胞的克隆形成分数、穿膜细胞数显著低于PcDNA3.1（+）转染组和未转染组，差异有统学意义（P＜0.05），PcDNA3.1（+）转染组和未转染组的克隆形成指数和穿膜细胞数差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：RKIP基因可能属于抑癌基因，RKIP表达上调对肿瘤细胞增殖和侵袭能力具有抑制效果，可作为治疗宫颈癌的新靶点。
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RKIP PTEN基因启动子区甲基化与肺癌的关系
目的:探讨RKIP基因和PTEN基因启动子区甲基化与肺癌及其临床病理特征的关系.方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)法,分析肺癌组织及相应癌旁正常肺组织中RKIP和PTEN启动子区甲基化表达情况.结果:45.8%(38/83)的肺癌组织和13.3%(11/83)的癌旁肺组织RKIP基因启动子区发生甲基化,51.8%(43/83)的肺癌组织和15.7%(13/83)的癌旁肺组织PTEN基因启动子区发生甲基化,癌组织中RKIP和PTEN启动子区甲基化率显著增高(P<0.05);发生淋巴结转移的43例肺癌组织中,27例RKIP基因启动子区发生甲基化,30例PTEN基因启动子区发生甲基化,淋巴结转移组RKIP及PTEN基因启动子区甲基化均显著高于无淋巴结转移组(P<0.05).结论:肺癌中RKIP和PTEN基因启动子区甲基化,可能是肺癌发生、发展及转移的重要原因之一.
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贲门腺癌患者癌组织RKIP基因甲基化和mRNA表达情况及其临床意义
目的：研究贲门腺癌患者癌组织 RKIP 基因甲基化和 mRNA 表达情况及其临床意义。方法选择2008—2013年河北工程大学附属医院收治的贲门腺癌患者160例，采用以Taq Man探针为基础的实时定量聚合酶链反应（PCR）和反转录-聚合酶链反应（ RT -PCR）检测贲门腺癌患者癌组织及癌旁正常组织 RKIP 基因甲基化和mRNA表达情况。结果贲门腺癌患者癌组织RKIP基因甲基化发生率为68.1%（109/160），高于癌旁正常组织的35.6%（57/160）（χ2=33.843，P=0.000）。不同年龄、性别、临床分期贲门腺癌患者RKIP基因甲基化发生率比较，差异无统计学意义（P>0.05）；不同病理分级及有无淋巴结转移贲门腺癌患者癌组织RKIP基因甲基化发生率比较，差异有统计学意义（ P<0.05）。贲门腺癌患者癌组织RKIP基因mRNA阳性表达率为48.1%，低于癌旁正常组织的71.9%（χ2=18.802，P<0.01）。癌组织RKIP基因甲基化患者RKIP基因mRNA阳性表达率低于癌组织RKIP基因非甲基化患者（χ2=6.410，P<0.01）。结论 RKIP基因甲基化导致该基因mRAN表达缺失可能是贲门腺癌的发病机制之一，且RKIP基因的高甲基化与贲门腺癌患者病理分级和淋巴结转移有关。
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Raf激酶抑制蛋白对HepG2肝癌细胞生物学特性影响的研究
目的 Raf激酶抑制蛋白(RKIP)是磷脂酰乙醇胺结合蛋白家族的重要成员,近来的一些研究表明RKIP基因的蛋白产物在人类肝癌组织中表达显著下调.本研究旨在探讨RKIP基因对于肝癌细胞增殖状态,细胞周期,凋亡状态等生物学特性及浸润转移能力等恶性表型的影响,以初步阐明其功能意义.方法 将RKIP基因插入载体pcDNA3.1构建PC-RKIP真核表达载体.脂质体转染肝癌细胞系HepG2建立稳定转染细胞系(Hep-RKIP),而后使用生长曲线法、平板克隆形成实验法、流式细胞仪,细胞迁徙实验法等方法分析稳定表达株相关生物学特性变化.同时设立空载体转染组和空白细胞组为对照.结果 与转染pcDNA3.1空载体及空白HepG2肝癌细胞相比,转染PC- RKIP载体的稳定表达细胞株生长有显著减慢,后两组之间亦无显著差异,平板克隆形成实验结果显示PC- RKIP转染组平均克隆形成率显著低于其它两组(P<0.05),细胞周期检测显示PC- RKIP转染组处于G0/G1期的细胞比例显著高于未处理的HepG2 细胞和转染 pcDNA 3.1空载体的HepG2细胞(P<0.05),而处于G2-M期的细胞比例显著均低于其它两组(P<0.05),其它各期细胞比例均无显著差异.流式细胞仪法检测细胞凋亡结果显示PC-RKIP转染组调亡比例为6.4%左右,显著高于对照组(P<0.05).细胞迁徙实验结果提示PC-RKIP转染组穿膜率与其它两组相比显著降低(P<0.05).结论 RKIP基因可能具有抑制细胞生长增殖及分裂作用,同时可影响细胞周期及细胞凋亡,对肝癌细胞侵袭转移能力可能有一定抑制作用,对抑制细胞恶性表型有一定意义.
