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可溶性白细胞介素-6受体克隆分泌表达杆状病毒文献资料
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人可溶性白细胞介素-6受体基因在昆虫细胞内的克隆与表达
在昆虫细胞中表达人可溶性白细胞介素-6受体(sIL-6R)基因。方法将人sIL-6R cDNA克隆至杆状病毒转移载体pAcGP67B中，再将重组转移载体质粒与野生病毒AcNPV DNA共转染昆虫细胞Sf9；经同源重组后，以终点稀释和斑点杂交法筛选重组杆状病毒；采用空斑分析法纯化重组的病毒，然后以纯化的重组病毒感染昆虫细胞Sf9。结果斑点杂交实验证实，纯化得到的重组病毒含有人sIL-6R基因；SDS-PAGE结果显示，表达产物sIL-6R相对分子质量为47 000左右；Western blot和受体配基结合实验表明，表达产物具有与其配基特异性地结合的能力。结论杆状病毒-昆虫细胞系统能分泌表达sIL-6R，表达产物具有免疫活性和生物活性。
