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激光打孔技术文献资料
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激光打孔技术在小鼠卵子冷冻保存上的运用
目的 比较卵子冷冻复苏后、以及复苏卵子经过激光打孔后,与新鲜精子、冷冻复苏精子体外受精,受精率的变化.方法 (1)通过免疫荧光染色技术,判断卵子冷冻前后透明带糖蛋白-2、微丝以及细胞核的变化;(2)冷冻C57BL/6J小鼠卵子,复苏后一部分卵子打孔,一部分不打孔,然后与9个品系的新鲜精子和冷冻精子体外受精,比较各组受精率的变化.结果 (1)新鲜卵子组透明带糖蛋白-2、微丝及细胞核结构清晰,而冷冻组以及冷冻剂处理组,微丝结构略有变化,透明带糖蛋白-2受到不同程度的损伤,而细胞核在冷冻前后无明显变化;(2)9个品系的新鲜精子与C57BL/6J复苏卵子受精率为17.6%～42.9%,平均为29.6%;新鲜精子与复苏打孔卵子受精率为29.1%～72.3%,平均为49.7%,差异显著(P<0.05);9个品系复苏精子与复苏卵子体外受精率为5.4%～23%,平均为15.5%;复苏精子与复苏打孔卵子受精率为16.7%～48.6%,平均为28.8%,差异显著(P<0.05).结论 (1)冷冻对卵子的透明带糖蛋白-2有较大的损伤,对微丝有一定的影响,但是对染色体没有影响;(2)冷冻卵子复苏后,体外受精率下降明显,但是复苏卵子经过激光打孔后,可以显著提高体外受精率.
