首页 > 文献资料
-
猴腺病毒(SAdV)PCR检测方法的建立及初步应用
目的 建立SAdV特异的PCR检测方法并研究实验猴群和猴源性生物制品中SAdV感染或污染情况.方法 比对分析多株SAdV序列,设计SAdV特异引物,优化PCR实验条件,建立的PCR方法经验证后检测实验猴群和猴源性生物制品,阳性产物测序并构建进化树.结果 经特异性和敏感性鉴定,在设计的5对引物中确定一对佳引物,可以区分SAdV和MAD,ICH,CELO且可以检测到的小DNA量为47.9 pg/mL.PCR方法检测实验猴群,阳性率49.2%,测序及进化分析表明,SAdV感染型别呈广泛基因多样性.主要分布在G亚属和以SAdV-49为代表的分支.结论经测序验证,PCR检测方法具有很好准确性,初步应用表明我国实验猴群中SAdV高度流行,应加强实验猴群及相关生物制品中SAdV的监测,避免人类感染SAdV的潜在风险.
-
猴腺病毒研究进展
猴腺病毒(simian adenovirus,SAdV)是猴类呼吸道和消化道的常在病毒之一,可引起肺炎、咽炎、肠胃炎、结膜炎等以粪口途径传播为主,主要感染猕猴、非洲绿猴、黑猩猩和狒狒等[1]属腺病毒科,哺乳动物腺病毒属.有学者认为SAdV感染有严格的种属特异性[1],也有报道认为其种间交叉传播在非人灵长类中可能普遍发生,是动物传染病似的感染[2,3].SAdV是否感染人类尚未见报道,但已从猴的分泌物中发现了可能和人腺病毒(human adenovius,HAdV)发生重组的新型腺病毒[4].SAdV与HAdV亲缘关系很近,感染引起的临床症状也相似,是人腺病毒研究的理想模型.目前已经制定了研发猴腺病毒模型的目标,用于研究感染机制,促进腺病毒基因治疗和疫苗开发进程[3].但猴腺病毒自然感染流行情况的研究依然很少.本文将就SAdV的发现与分类、生物学特性、感染特点及检测方法做一综述,为研究者提供一些有用参考.
-
广州地区猴腺病毒7型血清流行病学初步调查
目的 评估广州地区猴腺病毒7型( SAdV-7)先存中和抗体阳性率情况. 方法 首先构建以B-半乳糖苷酶(LacZ)为报告基因,结合CMV启动子的猴重组腺病毒7型载体SAdV7-CMV-LacZ.然后使用化学发光法,检测209份免疫功能正常的成人的血清样本中SAdV-7中和抗体阳性率隋况. 结果 我们发现SAdV-7中和抗体的阳性率为27.8%( 58/209).SAdV-7中和抗体在低滴度时阳性率高,并且随着滴度的升高,阳性血清分布率逐渐降低.在20～40岁人群中,SAdV-7中和抗体阳性率高,在＜20岁人群中未检测到SAdV-7中和抗体. 结论 广州地区人群中针对SAdV-7的先存中和抗体阳性率低.因此,SAdV-7在基因治疗及基因疫苗的应用上是一个具有吸引力的候选载体.
-
G亚属猴腺病毒荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用
目的 建立G亚属猴腺病毒( simian adenovirus,SAdV)特异的荧光定量PCR (FQ-PCR)检测方法,并研究实验猴群和猴源性生物制品中SAdV感染或污染情况.方法 根据G亚属SAdV基因保守区,设计特异性引物和TaqMan探针.制备重组质粒pGEM-TEasy-SAdVpol标准品,建立标准曲线.经灵敏度、特异性、准确性和重复性评价后,检测33份猴粪便样本和4批次脊髓灰质炎疫苗.结果 建立的FQ-PCR检测方法特异检测G亚属,与A、F亚属无交叉反应,准确性及重复性较好.标准曲线相关系数0.999,线性范围6 1g(60～6×106拷贝),低检出限可达6拷贝/μl.33份猴粪便样本中15份为阳性(45.5％),4批脊髓灰质炎疫苗均为阴性.结论 建立的FQ-PCR检测方法可定量检测G亚属SAdV拷贝数,初步应用表明我国实验猴群中G亚属SAdV流行率较高,应加强监测避免人类感染的潜在风险.
