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  • 祁连圆柏提取物诱导人肝癌细胞Bel-7402凋亡的作用及筛选研究

    作者:王索安;王小琦;徐涛;仇容;沈健;陈健;刘丹丹;张晓文

    目的 探讨祁连圆柏提取物体外对人肝癌细胞Bel-7402体外增殖抑制、凋亡作用机制并进行有效组分筛选研究.方法 采用硅胶柱层析法提取祁连圆柏有效抗瘤组分,分光光度法测定含量.用克隆形成实验、台盼蓝拒染法及MTT显色法检测祁连圆柏提取物对Bel-7402细胞增殖的影响,流式细胞术检测其诱导细胞凋亡的细胞周期阻滞状况及凋亡率,免疫组化观察对Bcl-2与Bax蛋白的表达水平,光镜、电镜观察凋亡细胞的组织形态和超微结构变化.结果 祁连圆柏提取物对Bel-7402细胞增殖有明显的抑制作用,其中C液-组分-3细胞的半数抑制浓度为2.47μg/ml.流式细胞检测结果G0/G1期细胞增多,G2/M期细胞减少,其中10~50μg/ml的祁连圆柏C液-组分-3在G1期细胞前出现典型“凋亡峰”;免疫组化SP法检测实验组细胞BCL-2基因蛋白表达降低,Bax基因蛋白表达增加.光镜与电镜下均见凋亡细胞明显增多.结论 祁连圆柏C液-组分-3具有显著的抑制Bel-7402细胞增殖以及诱导该细胞系凋亡的作用,其诱导Bel-7402细胞凋亡的作用与其上调Bax、下调Bcl-2蛋白的表达,激活Bax凋亡基因蛋白及Go/G1期阻滞有关,是其重要的抗肿瘤作用机制.

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