您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
CHO-S细胞株文献资料
-
人CD123稳定表达细胞株的建立与鉴定
目的 探索建立人CD123稳定表达细胞株的方法,为进一步实现人CD123的抗体规模化生产提供材料.方法 构建人CDl23 CDS区真核表达载体(hCD123 CDS-PEGFP-N1);经脂质体包裹转染中国仓鼠卵巢细胞CHO-S;经流式分选结合G418筛选,并用流式细胞术和Western印迹法检测人CD123蛋白的表达情况,初步筛选出人CD123高表达的CHO-S细胞株;并进一步用经人CD123Fc重组融合蛋白免疫的小鼠血清检测该细胞株hCD123表达情况.结果 测序及GenBank中序列比较结果显示扩增到的人CD123基因序列是正确的,酶切结果表明表达质粒构建正确;流式分选结合G418筛选得到1个人CD123高表达的细胞株--克隆8G9 CHO-S,其CD123-APC阳性细胞百分数为92.07%,用融合蛋白免疫的血清检测各细胞株人CD123表达情况,结果显示克隆8G9 CHO-S细胞和对照CHO-S细胞的CD123阳性率分别为(97.94±1.93)%和( 2.84±1.35)%,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 建立了人CD123抗原稳定高表达的细胞株克隆8G9 CHO-S,为进一步实现人CDI23的抗体规模化生产及其导向治疗奠定了坚实的基础.
