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利用SPR检测26肽与β1-肾上腺素受体自身抗体的相互作用
目的 探讨根据β1肾上腺素受体细胞外第二环(β1-adrenergic receptor,β1-AR-ECⅡ)的氨基酸序列合成的26肽与β1-肾上腺素受体β1-AR-ECⅡ的单克隆抗体(β1-adrenergic receptor autoantibodies,β1-AA)的相互作用.方法 根据人β1-肾上腺素受体细胞外第二环(β1-AR-ECⅡ)的氨基酸序列合成26肽;采用杂交瘤细胞融合的方法获得针对β1-AR-ECⅡ的单克隆抗体(β1-AA);利用表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)检测该合成的26肽与β1-AA的亲和力;利用乳鼠心肌细胞跳动频率实验验证该合成26肽对β1-AA的中和作用.结果 提取的β1-AA可以使乳鼠心肌细胞跳动频率增加(P<0.05),提示该β1-AA具有生物学活性;合成26肽与β1-AA结合的亲和力(KD)为4.44 μmol/L,属于中等强度结合;较β1-AA组相比,26肽处理后可明显降低心肌细胞跳动频率(P<0.05).结论 该合成26肽与β1-肾上腺素受体自身抗体之间存在相互作用,并且可以拮抗β1-AA引起的乳鼠心肌细胞跳动频率的增加.
关键词: β1-肾上腺素受体自身抗体 26肽 表面等离子共振