您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
DNA -胞嘧啶-甲基转移酶/代谢文献资料
-
HL-60细胞降钙素基因高甲基化的发生机制
目的:探讨HL-60细胞降钙素基因高甲基化的发生机制.方法:采用HL-60细胞,以正常骨髓单个核细胞为对照,应用甲基化敏感的限制性内切酶消化,结合设有内外参照的PCR 技术,检测CT 基因甲基化状态;应用同位素微量分析法检测DNA-胞嘧啶-甲基转移酶(DNA-cytosin-methyltransferase,MTase)活性;应用RT-PCR技术检测MTase 基因表达水平.结果:HL-60细胞经甲基化敏感的内切酶HpaⅡ消化后仍可扩增出清晰的CT基因特异条带,提示CT基因5′端呈高甲基化状态; HL-60细胞MTase 活性平均测定值为539.9 Bq,是正常骨髓单个核细胞(平均21.8 Bq)的29.8 倍;MTase基因的mRNA表达水平以MTase与β-actin内参照RT-PCR产物的比值表示,HL-60细胞(0.72)为正常对照(0.02)的36倍.结论:HL-60细胞CT基因呈高甲基化状态,MTase活性增高可能是其发生机制之一.
关键词： HL-60细胞 降钙素 甲基化 DNA -胞嘧啶-甲基转移酶/代谢
