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江浙蝮蛇毒镇痛组分的分离纯化及其理化性质
目的分离筛选江浙蝮蛇毒中主要镇痛组分,研究其分子量、等电点、纯度、氨基酸序列、稳定性等理化性质,以及镇痛作用、机体耐受性和依赖性等药理学性质.方法采用离子交换和分子筛,以柱层析法分离蛇毒组分.用生化测定方法,测定其理化性质.用热板法和醋酸扭体法等确定佳镇痛组分,并用纳洛酮催促和自然戒断实验、耐受性实验考察其依赖性和耐受性.结果分离获得14个蛋白组分,经ED50/LD50筛选出佳镇痛组分C4,鉴定结果表明纯度为电泳纯,HPLC相对纯度为92.16%,分子量16.6 ku,等电点8.8,氨基酸序列与磷脂酶A2同源,为一种新的镇痛蛋白,并获得其紫外吸收特征峰、镇痛耐受和依赖性等性质.结论 C4组分具有显著的镇痛效果,未发现耐受性和依赖性,值得进一步研究开发.
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蝮蛇蛇毒中提取的一种具有激肽原酶活性的蛋白水解酶
目的:从蛇毒中获得大量高纯度的具有激肽原酶活性的蛋白水解酶.方法:采用离子交换和亲和层析技术进行纯化.结果:从江浙蝮蛇毒中提取出了一种高纯度的具有激肽原酶活性的蛋白水解酶,不需活化即可水解激肽原,释放激肽,并具有精氨酸酯酶活性.粗毒经提纯,比活可达800 U/mg以上,远远高于哺乳动物来源的激肽原酶,纯度可达95%以上.对其性质考察,Mr为38 000,N-末端的15个氨基酸序列分析表明,该酶与蛇毒丝氨酸蛋白酶及胰蛋白酶——激肽释放酶同源.结论:这种方法适合于工业化生产.