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大鼠乙醛脱氢酶2基因调控腺病毒载体构建方法及意义
目的：观察持续活化突变体腺病毒转染大鼠心肌细胞的转染效果及对乙醛脱氢酶2（ALDH2）表达的影响。方法分别将扩增得到的 ALDH2持续活化突变体基因及合成 ALDH2-siRNA 序列颈环状 DNA，连接相应载体后，得到重组穿梭质粒；对2种穿梭质粒分别进行扩增和酶切鉴定，并导入 pAdeno 腺病毒载体，转染293细胞进行扩增与纯化。将1日龄雄性 SD 大鼠心肌细胞进行培养，将2种重组腺病毒及对照空载体分别感染细胞，随后检测 ALDH2表达量。结果2种载体构建正确，纯化后两者滴度分别为2×1010，1．6×1010 PFU? mL-1。实验组 ALDH2表达量与对照组相比差异具有统计学意义（P ＜0．01）。结论成功构建大鼠 ALDH2基因双向调控腺病毒载体，可以有效调控离体大鼠心肌细胞 ALDH2表达。
