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UPLC-MS/MS法分析新型多柔比星前药在肿瘤细胞中的浓度
本研究采用超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱技术,建立在肿瘤细胞中测定单硫键连接的多柔比星前药(DOX-S-DOX)浓度的方法学,并应用于人乳腺癌细胞(MCF-7)的体外药代动力学研究.细胞样品前处理采用乙腈沉淀蛋白的方法.以柔红霉素为内标,采用反相C18色谱柱(Agilent Eclipse plus C18 RRHD 1.8 μm,2.1 mm×50 mm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液,以0.4 mL·min-1的流速进行梯度洗脱,每个样品的分析时间为6.0 min,样品经电喷雾离子源正离子化后,在多反应监测模式下测定DOX-S-DOX (m/z 1251.3→459.4)的浓度.线性范围为20.0~400 ng·mL-1 (r2≥0.99).高、中、低三个浓度质控样本的准确度(RE%)在-2.04%~2.62%之间,批内、批间精密度(RSD%)均在3.77%~8.35%以内.基质效应在104.8%~113.9%之间,提取回收率在97.67%~ 104.2%之间.该分析方法较为简便,其线性范围和灵敏度能够满足DOX-S-DOX (10 μg·mL-1)在MCF-7细胞中的药代动力学研究.
关键词: 多柔比星前药 超高效液相色谱串联质谱 细胞药代动力学