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依博素文献资料
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依博素对THP-1细胞炎症细胞因子的作用
在THP-1细胞中,研究依博素对炎症细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子α (TNFα)的作用,以探讨其抗炎作用机制.采用荧光标记底物,证明了依博素对IL-1β转化酶(ICE)和TNFα转化酶(TACE)活性的抑制作用；应用实时定量PCR (real-time PCR)确定了依博素对上述炎症细胞因子mRNA表达水平的降低作用；利用酶联免疫吸附方法(ELISA)及Western blotting检测证明,依博素对3种炎症细胞因子分泌水平的抑制作用.上述结果表明,在THP-1细胞中,依博素可通过抑制ICE酶和TACE酶活性、降低炎症细胞因子mRNA合成作用而使各炎症细胞因子的生成量下降.本研究在细胞水平初步考察了依博素的抗炎作用机制,为治疗类风湿性关节炎新药研究奠定了相关基础.
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依博素检测方法的研究
目的:依博素是一种链霉菌产生的新天然化合物,体内具有较强抗类风湿关节炎活性,有可能发展成为具有我国自主知识产权的新药.为了确定发酵液中依博素的含量,基于其对ICE酶(IL-1 β转化酶)具有抑制活性,本研究建立了一种检测依博素的方法.方法:以荧光标记的ICE酶底物Ac-Trp-Glu-AlaAsp-AMC与含依博素的发酵液进行反应,采用不加依博素及重组ICE酶的样品作为对照,用多标记微孔板检测仪测定产物荧光强度,确定发酵液中依博素的含量.结果:采用上述方法,分别对多批次摇瓶及发酵罐培养的发酵液进行了测定,结果显示,本方法可有效确定发酵液中依博素的含量.结论:本方法是检测依博素发酵水平的有效方法.
