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基于GC/TOFMS测定技术的Wistar大鼠血浆代谢谱增龄性变化研究
研究Wistar大鼠血浆中小分子化合物随生长而产生的增龄性差异,揭示实验大鼠生长过程中机体内源性物质基础的变化规律.运用基于GC/TOFMS检测技术的代谢组学方法,分析Wistar模型大鼠12、14、16、18及20周龄时血浆中内源性小分子代谢物,经数据处理和模式识别后,不同周龄组的大鼠可被清晰区分并呈明显的动态变化轨迹.血浆中柠檬酸、乌头酸、十六碳烯酸、苯丙氨酸、羟脯氨酸、α-生育酚、精氨酸等代谢产物的相对含量发生了明显改变,提示为潜在的生物标志物,这些化合物与能量代谢、脂质过氧化、抗氧化平衡等密切相关.本研究一方面为探索实验大鼠生长过程中的生理变化及生物学本质提供了基础信息,此外还发现即创便是生理学上正常的动物,其体内代谢水平(随生长有一定改变)也不是恒定不变的,提示在利用代谢组学、生物标志物评价药物毒性和药效时,需结合正常对照组的动态变化规律,以便作出独立于生长因素的正确判断.
关键词： 代谢组学 生长 气相色谱/飞行时间质谱 -
大鼠心肌内源性代谢物测定方法的建立及在心肌缺血大鼠模型代谢组学研究中的应用
目的:建立测定大鼠心肌中内源性代谢物的方法,并将其应用于心肌缺血模型的代谢组学研究.方法:利用实验设计(DOE)方案,以甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、三氯甲烷不同配比的混合溶剂为提取溶剂,研究心肌组织中小分子化合物的佳提取方案,根据心肌组织中所能测定的化合物特点和种类优化了GC/TOF-MS测定方法,数据经过偏小二乘法(PLS)进行分析.利用该方法测定心肌缺血模型和正常对照大鼠心肌的内源性小分子代谢物.结果:大鼠心肌组织佳的提取方案是将心肌组织研磨成细粉(50 mg)后用甲醇-水(900 μL∶ 50 μL)进行提取.心肌比血浆含有更多种类的糖类、核苷类等细胞生命活动所必需的小分子化合物.利用该方法可从偏小二乘-判别式法(PLS-DA)得分图中很好地区分正常对照组和模型组.结论:本研究建立了全面测定大鼠心肌中内源性代谢物的方法,该方法可成功用于大鼠心肌缺血模型代谢组学研究.
