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TAK1赖氨酸158位点发生Lys63连接多聚泛素化在辐射诱导NF-κB激活过程中的作用
目的 研究转化生长因子激酶1(TAK1) Lys 63连接多聚泛素化在辐射导致的NF-κB激活过程中起到的作用及其作用位点.方法 通过基因瞬时转染技术将FLAG-TAK1和HA-Ub-K63质粒共同转染至HEK-293T细胞,应用免疫沉淀和免疫印迹技术研究辐射对TAK1泛素化的影响;用稳定转染TAK1表达的HeLa细胞,证实辐射对TAK1泛素化的影响.通过免疫印迹技术,比较分析辐射对稳定转染TAK1 K158R的MEF细胞与TAK1野生型MEF细胞比较分析辐射对它表达IKKs、p38及JNK的影响,以证明辐射诱导的TAK1-Lys 63多聚泛素化的位点是否在TAK1赖氨酸158位点.结果 瞬时转染的HEK-293T细胞接受辐射后1h开始出现明显的TAK1泛素化表现,2h更明显.在稳定表达FLAG-TAK1的HeLa细胞系中得到证实.与TAK1野生型MEF细胞相比,TAK1 K158R突变的MEF细胞中辐射诱导的IKKs和p38磷酸化作用减低.结论 TAK1多聚泛素化在辐射导致的NF-κB激活过程中起到关键作用,辐射所致TAK1-Lys 63连接多聚泛素化发生在TAK1的赖氨酸158位点.
关键词: 辐射损伤 转化生长因子β激酶1 多聚泛素化 NF-κB 信号通路 -
结肠腺癌中转化生长因子β激酶1与细胞增殖的关系
目的:检测结肠腺癌中转化生长因子β激酶(TAK)1和 Ki67表达,观察 TAK1和 Ki67标记的增殖指数的关系。方法62例结肠腺癌术后存留的蜡块组织作为观察组,15例距结肠肿物边缘>5 cm 的正常结肠黏膜组织作为对照组。应用免疫组化 SP 法检测两组中 TAK1和 Ki67的表达。结果两组中 TAK1和 Ki67的表达差异有统计学意义。观察组中 TAK1和 Ki67的表达均与肿瘤的浸润深度和大径密切相关,TAK1的表达与分化程度密切相关。相关分析显示观察组中 TAK1和 Ki67的表达呈正相关性。结论结肠腺癌中 TAK1和 Ki67高表达对促进肿瘤的形成和进展有一定作用。 TAK1对 Ki67标记的增殖可能有一定作用。
关键词: 结肠腺癌 转化生长因子β激酶1 Ki67 免疫组化