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HA-1077文献资料
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Rho激酶抑制减少体外培养大鼠主动脉环的血管新生
背景:目前在血管新生的研究方法中,体外器官水平主要采用鸡胚绒毛尿囊膜实验模型,此方法的应用有其局限性.研究查明,Rho激酶参与血管新生,但尚缺少体外器官水平的深入观察.目的:建立大鼠主动脉环体外培养血管新生实验模型,以Rho激酶抑制剂HA-1077为干预因素,观察Rho激酶活性抑制对血管新生的影响,以及新生血管的生长特征和规律.设计、时间及地点:以血管环为对象,观察测量对比实验,于2008-10-21/2009-01-28在广东医学院生理学研究室进行.材料:2月龄SPF级SD大鼠,雌雄不限;HA-1077(Cat:371970)为Calbiochem公司产品.方法:无菌条件下取大鼠一段胸主动脉,剪为长约1 mm的血管环,随机分为对照组、HA-1077低、中、高浓度组,对照组用HG-DMEM+体积分数15%胎牛血清的培养液培养,HA-1077组分别在培养液中加入10,30,60 mmol/L HA-1077,第5天终止实验.主要观察指标:拍摄微血管生长图像,计数体外培养的主动脉环新生微血管分支数;Western Blot检测ROCK Ⅰ及ROCKⅡ的表达.结果:与对照组比较,HA-1077低浓度组新生微血管数明显增加(P<0.01);中、高浓度组新生微血管数较对照组明显减少(P<0.01).对照组和HA-1077低浓度组都有ROCK Ⅰ和ROCK Ⅱ表达,组间比较差异无显著性意义;HA-1077中、高浓度组则基本未见ROCK Ⅰ或ROCK Ⅱ表达.结论:30,60 mmol/L HA-1077可以抑制血管新生,并抑制Rho激酶表达.提示Rho激酶抑制可以减少体外培养大鼠主动脉环的血管新生.
