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aroB基因文献资料
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脱氢奎尼酸合成酶基因aroB在大肠杆菌中的克隆和表达
目的: 克隆表达大肠杆菌脱氢奎尼酸合成酶基因aroB,并测定其生物学活性.方法: 根据大肠杆菌中aroB基因的序列设计了一对引物,利用PCR技术扩增得到aroB基因,将其克隆入pGEM-Teasy载体中,以双脱氧法进行测序,然后再克隆入高效原核表达载体pBV220,对该重组子的SD序列进行调节后利用温度诱导表达,并测酶的生物活性.结果: 构建了aroB基因的克隆和表达重组子,经SD序列调节后,aroB基因获得高效表达,SDS-PAGE图谱显示新增38.8×103蛋白带,酶活性测定结果表明脱氢奎尼酸合成酶的相对酶活性为5.4.结论: 实现了脱氢奎尼酸合成酶基因在大肠杆菌中的高效表达,为构建产脱氢奎尼酸工程菌种奠定了基础.
