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NADPH氧化酶参与人晶状体上皮细胞增殖及其表达
目的 观察烟酰胺二磷酸腺苷(NADPH)氧化酶的抑制剂能否抑制人晶状体上皮细胞增殖,探讨NADPH氧化酶亚单位NOX的同源异构体在人晶状体上皮细胞mRNA的表达情况.设计实验性研究.研究对象人品状体上皮细胞永生系(SRA01/04).方法 实验分为4组,SRA 01/04巾加入表皮生长因子(EGF)(EGF组),加入NADPH氧化酶抑制剂二业苯基碘(DPI)(DPI组),先后加入DPI和EGF(DPI+EGF组),不加入上述物质为对照组.利用酶标仪和活细胞计数CCK-8试剂盒检测各组人晶状体上皮细胞0D450值.用RT-PCR方法检测NOX的同源异构体在SRA 01/04中的表达,将RT-PCR产物测序,利用NCBI BLAST软件对测序结果与cDNA进行序列对比.主要指标人晶状体上皮细胞的OD450值,NOX的同源异构体表达情况及其与人其他组织的序列对比.结果 加入CCK-8 3.5小时后,EGF组比对照组OD450值升高了12.0%(P=0.000);DPI组比对照组OD450值下降了25.5%(P=0.000);DPI+EGF绀OD450值比EGF组降低了26.1%(P=0.000).RT-PCR结果表明,NOX蛋白的5种同源异构体[包括NOX1、NOX2(gpg1phox)、NOX3、NOX4、NOX5]的mRNA在SRA 01/04中均有表达.人晶状体上皮细胞中的NOX1-5的序列与人其他组织的相似性分别为100%、100%、99.7%、100%、100%.结论 NADPH氧化酶可能促进人晶状体上皮细胞的增殖;NOX同源异构体NOX1、NOX2、NOX3、NOX4、NOX5的mRNA在人晶状体上皮细胞SRA 01/04中均有表达,其中NOX1明显弱于其他四种NOX.(眼科,2009,18:107-113)
关键词： 晶状体 娴酰胺二磷酸腺苷氧化酶
