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miR96文献资料
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CMC-TAT蛋白转导肽纳米载体体外转染效果评估
目的：构建羧甲基壳聚糖-TAT蛋白转导肽纳米载体（CTNs），探究CTNs介导miR96转染293细胞和耳蜗基底膜的效率及安全性，为miR96在内耳的功能研究奠定基础。方法应用羧甲基化的壳聚糖（CMC）与TAT蛋白转导肽合成CTNs，携带标记花青染料荧光（cy3）的miR96模拟物（miR96 mimics），转染293细胞和耳蜗基底膜，利用激光共聚焦荧光显微镜对293细胞和耳蜗基底膜铺片进行荧光阳性细胞计数，以阳离子脂质体作为对照，评价转染效率，采用MTT试验评价CTNs的安全性。结果成功制备了CTNs，纳米颗粒平均直径约186.6nm，粒径分布集中，无明显聚集现象；CTNs-miR96-cy3转染293细胞的平均阳性细胞率为32.6%,转染耳蜗基底膜毛细胞的平均阳性细胞率为24.4%，均低于阳离子脂质体-miR96-cy3；MTT试验示CTNs细胞毒性低于阳离子脂质体。结论CTNs作为一种新型的纳米载体，可携带miR96成功转染耳蜗基底膜，提示了纳米载体作为miRNA载体的可行性，并且安全性较高，但转染效率不足。
