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胞内钙离子活动文献资料
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离体豚鼠前庭神经节细胞的分离及胞内钙离子活动的观察
目的进一步了解前庭神经节细胞的形态和电生理特性.方法用体重250～300g的豚鼠,断头后取出颞骨,剔除面神经和听神经,取出前庭神经节.经酶消化后用机械法分离成单细胞,用钙离子敏感的荧光染料Fura-2染色,于数字荧光显微镜下观察.结果分离出的单个前庭神经节细胞形状为园形、椭园形和不规则型,直径从20μm到30μm不等,分为有微绒毛的Ⅰ型细胞和无绒毛的Ⅱ型细胞.在体外室温22～24℃下可存活5～6h.用150 mmol/L KCl灌流1分钟,灌流开始20秒后,前庭神经节细胞胞内钙离子荧光强度比率从静止时的0.47±0.04,增至1.18±0.19,40秒后达峰值1.43±0.18,然后缓慢下降.300秒后降至峰值一半,约10分钟后基本恢复至正常,重复刺激可得到类似的结果.在无钙外环境中,150 mmol/L KCl不能诱发胞内钙离子浓度增加.1μM ionomycin可诱发不可逆的胞内钙离子浓度增加.结论本研究使用酶消化后机械分离法分离出活性良好的单个神经节细胞,前庭神经节细胞膜存在电压依赖性钙离子通道.
