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MCCC2在前列腺癌细胞系中的表达及其对前列腺癌转移影响的初步研究
目的 分析比较MCCC2基因在不同类型前列腺癌细胞系中的表达差异,通过构建前列腺癌MCCC2基因稳定表达细胞株研究其表达对前列腺癌细胞迁移能力的影响,初步证实MCCC2基因在前列腺癌进展转移中的意义.方法 利用RT-PCR方法检测MCCC2基因在局限性和转移性前列腺癌细胞中的表达情况,分析其表达与前列腺癌进展转移的关系;以前列腺癌细胞基因组cDNA为模板,通过PCR扩增MCCC2基因,重组构建含有Flag标签的pCDNA3.1(+)-Flag-MCCC2质粒,包装慢病毒,转染前列腺癌细胞,通过荧光显微镜、RT-PCR和Western Blot等方法鉴定MCCC2基因在细胞内的表达情况;利用Transwell及划痕实验研究MCCC2基因对前列腺癌细胞迁移能力的改变.结果 较局限性前列腺癌细胞22Rv1,MCCC2基因mRNA在转移性前列腺癌细胞LNCaP、PC3及DU145中的表达显著升高.同时,激素非依赖性前列腺癌细胞中MCCC2 mRNA表达比激素依赖性前列腺癌细胞明显增强.进而,我们成功构建和包装了表达MCCC2基因的pCDNA3.1 (+)-Flag-MCCC2重组质粒及慢病毒,并转染前列腺癌细胞,筛选出稳定表达株;并且,通过Transwell和划痕实验证实MCCC2基因表达与前列腺癌细胞的迁移能力呈正性关联.结论 局限性和转移性前列腺癌细胞、激素依赖性和非依赖性前列腺癌细胞中MCCC2基因的表达存在明显差异,提示MCCC2可能在前列腺癌的进展转移过程中发挥重要作用;成功构建了MCCC2基因稳定表达的前列腺癌细胞株,并初步证实其过表达可以促进前列腺癌细胞的迁移能力,为进一步研究MCCC2基因在前列腺癌进展、转移等过程中的具体作用奠定了实验基础.
