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BCG823文献资料
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硫氧还蛋白1对胃癌细胞系BCG823生长的影响
目的 探讨硫氧还蛋白1( thioredoxin-1,Trx1)对胃癌细胞系细胞周期及增殖速度的影响. 方法 对BCG823、AGS、MNK45、NUGC3、PHM82五种胃癌细胞系的质粒转染效率进行测定,选择出转染效率高的细胞系；并用实时PCR( RT-PCR)测定胃癌细胞系中Trx1的表达水平,选择出表达较低的细胞系.将所构建的Trx1真核重组表达载体pcDNA3.1 myc-His-Trx1转染入上述实验筛选出的胃癌细胞系,使细胞中Trx1过表达,用流式细胞仪检测过表达Trx1的胃癌细胞进入S期的比例. 结果 BCG823、AGS两种细胞系的转染效率高,满足实验需要.BCG823的Trx1表达较AGS低[ BCG823细胞系的ΔCT(Trx-GAPDH)=1.43,AGS细胞系的ΔCT(Trx-GAPDH)=1.10,ΔCT值与表达量成反比],选择BCG823作为实验对象.转染pcDNA3.1 myc-His-Trx1的细胞Trx1表达升高(与内参蛋白的比值为0.45±0.02和0.26±0.03,n=3,t=9.127,P=0.000),进入S期的细胞比例升高(转染带有Trx1质粒的细胞进入S期的比例为28.54％,而转染了空载体者进入S期的比例为22.24％,x2=104.759,P=0.000). 结论 Trx1表达水平上调可以促进胃癌细胞进入S期.
