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  • CpG 岛岸甲基化调控人 T 细胞系中 lag3 表达

    作者:郝书民;仇超;张林霞;张晓燕;徐建青

    目的 探讨表观遗传因素DNA甲基化对人T细胞系中淋巴细胞活化基因3 ( lympho-cyte activation gene 3, lag3)表达的影响. 方法 检测不同T细胞系中lag3的表达水平,选定lag3表达高低相对的细胞系组成研究系统. 分析lag3启动子和转录区的CpG分布以确定潜在表观调控区( CpG岛和CpG岛岸) ,分别测定各T细胞系中相关区段的DNA甲基化水平. 用5-杂氮胞苷( 5-Aza-2′-deoxycytidine, 5-Aza-2′-dc)对细胞系做去甲基化处理,检测lag3表达水平及DNA甲基化水平的变化. 结果 lag3表达水平在J.CaM1.6和CEM细胞中极低,在Jurkat E6-1细胞中相对较高. 不同细胞系中,CpG岛均高度甲基化;CpG岛岸在J.CaM1.6和CEM细胞中高度甲基化,但在Jurkat E6-1细胞中甲基化水平较低. 5-Aza-2′-dc处理后,J.CaM1.6和CEM细胞中lag3 mRNA和蛋白质的表达均显著上调,且伴随CpG岛岸去甲基化;而Jurkat E6-1细胞中,未见CpG岛岸甲基化和lag3表达水平的显著变化. 5-Aza-2′-dc处理不能使CpG岛去甲基化. 结论 CpG岛岸的甲基化与去甲基化是lag3转录的表观调控开关.

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