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两种新型隐球菌选择性培养基的比较研究
目的 比较咖啡酸玉米琼脂培养基(caffeic acid cornmeal agar medium,CACA)和黑米琼脂培养基(black rice agar medium)对鸽粪中新型隐球菌的分离效果. 方法 用无菌竹签从鸽舍随机采取鸽粪标本,取0.6g与10 ml无菌生理盐水制成悬液,然后按每个平板100μl分别接种咖啡酸玉米琼脂培养基和黑米琼脂培养基,肉眼观察菌落形态、颜色,光学显微镜下观察菌体形态,同时用特异性引物CN4和CN5扩增新型隐球菌URA基因,分别统计两种培养基中出现阳性菌株的平板数目. 结果 黑米琼脂培养基中新型隐球菌菌落呈棕黄色,外观湿润,状似胶汁.共分离获得23株新型隐球菌,检出率32.86%.CACA中新型隐球菌菌落较黑米琼脂培养基上的菌落小,褐色,干燥.共分离出11株新型隐球菌,检出率为15.71%.黑米琼脂培养基的检出率与CACA比较差异有统计学意义(P<0.05),且丝状真菌覆盖性生长的平板数目少于CACA,污染程度低于CACA;通过墨汁染色,在光学显微镜下观察新型隐球菌菌体呈圆形或卵圆形,外有宽厚荚膜,PCR扩增得到了目的条带产物. 结论 黑米琼脂培养基作为新型隐球菌的选择性培养基其分离培养效果(检出效果和检出率)优于CACA.
关键词: 新型隐球菌 黑米琼脂培养基 咖啡酸玉米琼脂培养基(CACA) 鸽粪