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活化T细胞表面Tn抗原动态变化与Cosmc之间的关系研究
目的 探讨T细胞活化过程中表面Tn抗原的表达状况与Cosmc转录及蛋白表达水平之间的关系. 方法 30例健康志愿者,男15例,女15例,平均年龄(34±8.9).抽取志愿者外周静脉血,肝素抗凝,采用Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞(peripheral blood mononuelear cell,PBMC),免疫磁珠法分选纯化的CD3+T细胞,分别采用T细胞活化剂Cocktail、CD3/CD28 Dynabeads刺激12、24、36、48、60、72 h.流式细胞术检测两种活化剂刺激活化前后不同时间点CD3+T细胞中Tn+细胞的百分率及Tn抗原平均荧光强度,采用RT-PCR和Western blot检测两种活化剂刺激活化前后不同时间点T细胞中Cosmc转录及蛋白表达状况,采用荧光分析法检测T-synthase活性,应用SPASS13.0软件进行统计学分析,阐明活化T细胞表面Tn抗原动态变化与Cosmc之间的关系. 结果 Cocktail、CD3/CD28 Dynabeads均能促使活化T细胞表面表达Tn抗原,以及Tn抗原表达的平均荧光强度随活化时间的延长先升高后下降.CD3/CD28Dynabeads活化组Tn+细胞百分率的峰值出现在活化后48 h,而Cocktail活化组峰值出现在活化后60 h,差异具有统计学意义(P＜0.05).Cosmc转录及蛋白水平、T-synthase活性随活化时间延长先降低后升高,变化趋势与Tn抗原表达水平相反,差异具有统计学意义(P＜0.05). 结论 T细胞活化过程中Tn抗原表达呈动态变化,表达水平与Cosmc转录及蛋白水平下降、T-synthase活性降低密切相关,为以Tn抗原为靶点治疗由T细胞活化引起的免疫性疾病提供了重要依据.
