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谱系示踪文献资料
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细胞谱系示踪技术
细胞谱系示踪（ cell lineage tracing）是指利用各种方式标记细胞，并对包括其后代所有细胞的增殖、分化以及迁移等活动进行追踪观察。自20世纪以来，谱系示踪技术为研究器官发育、组织损伤修复以及单细胞的分化命运提供了重要的手段。近些年，随着基因工程技术的飞速发展，细胞谱系示踪技术也有所突破，尤其是诱导性重组酶Cre/loxp系统的应用，极大地拓宽了细胞谱系示踪技术的应用范围。本文将结合细胞谱系示踪技术在多种研究中的应用，对该技术的原理、特点以及新进展做一综述。
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Tbx18-Cre基因敲入小鼠Cre基因保真性研究
目的 揭示Tbx18-Cre基因敲入小鼠Cre基因表达的保真性.方法用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)快速检测基因敲入小鼠外源基因Cre的相对拷贝数;Junction PCR验证基因敲入小鼠整合位点Tbx18-Cre的纯合性;利用Tbx18 Cre-/-纯合子小鼠模型验证Cre基因对下游基因的影响;利用Tbx18-Cre/Rosa26R-LacZ示踪模型,通过检测LacZ的表达,验证Cre基因的时空保真性.结果 实时荧光定量PCR验证Tbx18基因敲入小鼠外源基因Cre的相对拷贝数准确,Junction PCR验证其整合位点特异.Tbx18 Cre-/-纯合子小鼠模型能特异性阻断转录因子Tbx18的表达,引起信号下游基因CX40、CX43、CX45的表达明显升高.Tbx18-Cre/Rosa26R-LacZ示踪模型LacZ蛋白表达部位与Tbx18 mRNA表达部位一致.结论 Tbx18-Cre基因敲入小鼠中Cre基因具有高度准确的时空保真性和特异性.
关键词： Tbx18-Cre基因敲入小鼠 整合位点 谱系示踪
