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FLI-1:RNA干扰文献资料
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用慢病毒载体介导的RNAi感染CB3细胞后抑制FLI-1的表达
目的 观察慢病毒载体介导的RNA干扰(RNAi)方法 对小鼠红白血病细胞(CBa)中FLI-1基因表达的抑制作用.方法 设计制备针对目的基因FLI-1的小干扰RNA( siRNA),构建制备目的基因的siRNA慢病毒载体,PCR阳性菌落进行测序鉴定,对慢病毒包装与滴度测定后感染CB3细胞,观察绿色荧光蛋白(GFP)表达情况.RT-PCR和Western blot检测病毒感染CB3细胞后FLI-1的表达.结果 成功构建了针对FLI-1基因的siRNA慢病毒载体,并包装成慢病毒颗粒,病毒滴度为1.5E+9TU/mL,并可将其高效感染CB3细胞,病毒感染后FLI-1在转录水平和翻译水平的表达量显著低于对照组和未感染病毒组(P＜0.001).结论 成功构建了针对FLI-1基因的siRNA慢病毒载体,并可有效抑制CB3细胞中FLI-1基因的表达.
关键词： FLI-1:RNA干扰 慢病毒载体
