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曼陀罗种子化学成分研究
目的:采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱Sephadex LH-20和MCI等各种柱色谱进行分离纯化,通过化合物的理化常数和波谱数据鉴定其结构.方法:采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱Sephadex LH-20和MCI等各种柱色谱进行分离纯化,通过化合物的理化常数和波谱数据鉴定其结构.结果:从曼陀罗种子的95％乙醇提取物中分离并鉴定了12个化合物,分别为N-trans-feruloyl tryptamine(1),hyoscyamilactol(2),东莨菪内酯(3),umckalin(4),曼陀罗萜醇酮(5),曼陀罗萜二醇(6),N-反式阿魏酰基酪胺(7),cleomiscosin A(8),秦皮素(9),东莨菪碱(10) 1-acetyl-7-hydroxy-β-carboline( 11),7-hydroxy-β-carbolinel -propionic acid (12).结论:化合物2,7,9,12均为首次从曼陀罗属植物中分得；化合物1,4,8,11均为首次从茄科植物中分到.研究茄科Solanaceae植物曼陀罗Datura stramonium种子的化学成分.
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DNA条形码鉴定洋金花及其伪品
为建立有毒中药洋金花及其伪品DNA条形码鉴定方法,采用国际通用的条形码序列ITS2、psbA-trnH、matK和rbcL对洋金花原植物白花曼陀罗及其伪品毛曼陀罗、曼陀罗和木本曼陀罗4个种共计20份材料进行了比较研究.PCR及测序成功率分别为ITS2 (100％)、mark (100％)、psbA-trnH (90％)、rbcL (85％).采用CodonCode Aligner进行序列拼接,采用MEGA 4.1计算白花曼陀罗及其伪品的种内、种间的K2P距离,并基于K2P模型构建NJ树.结果显示ITS2序列共有30个单核苷酸多态性(SNPs)位点、psb A-trnH序列有33个单碱基的插入和缺失.ITS2和psbA-trnH序列种间遗传距离大于种内,matK和rbcL种内和种间没有明显“BarcodingGap”.4个条形码序列及其组合获得的分子系统树(ITS2、psb A-trnH、mark、rbcL、matK +rbcL)均分成了两大支,木本曼陀罗单聚为一支,该分子证据支持将Brugmansia提升为属水平.实验结果表明ITS2及psbA-trnH 序列可以作为洋金花及其伪品鉴定用的条形码序列.
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基于ITS2条形码的曼陀罗属药用植物DNA分子鉴定
目的:利用ITS2序列对曼陀罗属药用植物进行分子鉴定.方法:对曼陀罗属及烟草属植物样本的ITS2序列进行PCR扩增和测序.为扩大研究范围,又从GenBank中下载了上述两属植物样本的ITS2序列.所有序列经CodonCode Aligner软件拼接,DNAMAN软件比对分析,并采用MEGA 5.10计算相关数据,基于K2P模型构建聚类树(NJ树).从ITS2网站上获得所测样本及下载序列的ITS2二级结构信息,分析各样本间ITS2序列二级结构的差异.结果:两属样本被聚为三大支.烟草属单聚为一支;木本曼陀罗单聚为一支,与前人研究结果相同:木本曼陀罗Brugmansia可同曼陀罗属Datura分为两属;曼陀罗属的其他物种聚在一支,且各品种种内样本均各为一支,表现出单系性,与其他种可明显区分;且每两支之间的bootstrap支持率均在95％以上.结论:ITS2序列在近缘物种间的系统学研究、品种的鉴定方面具有较大的应用潜力.
