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基于双向位点特异性PCR的金银花真伪鉴别方法研究
目的:筛选获得金银花真伪鉴别SNP位点并建立双向位点特异性PCR方法,用于鉴别金银花和其常见伪品以及两者的混杂品.方法:通过对GenBank收录的忍冬属植物叶绿体trnL-trnF序列进行对比分析,获得金银花真伪鉴别SNP位点;并依据该SNP位点设计特异性引物,对84份金银花基原植物及其市售饮片、伪品进行双向位点特异性PCR扩增,并根据真伪品的特异性条带进行金银花药材鉴别.结果:退火温度为61℃时,正品均出现468 bp的条带,红腺忍冬、华南忍冬、灰毡毛忍冬、黄褐毛忍冬、水忍冬、金银忍冬、郁香忍冬、新疆忍冬、繁果忍冬等9个伪品均出现324 bp的条带,在正品DNA中掺入5%以上伪品时同时出现正品和伪品条带.结论:双向位点特异性PCR可以鉴别金银花真伪品及两者的混杂样品.
关键词: 双向位点特异性PCR 金银花 分子鉴定 -
基于双向位点特异性PCR的金银花真伪鉴别方法研究
目的:探析基于双向位点特异性PCR的金银花真伪鉴别方法。方法将88份金银花真品、金银花伪品及两者混杂品随机分为两组,每组44份。对照组采用实验鉴别,观察组采用双向位点特异性PCR技术辨别,对比分析鉴别效果。结果当退火温度为61℃时,真品金银花条带为468hp,伪品条带为324hp,正品金银花中掺杂5%以上伪品可同时出现正品与伪品条带,两组在鉴别结果有明显差异(P>0.05);观察组的鉴别时间短于对照组(P<0.05)。结论双向位点特异性PCR检测技术可有效辨别金银花的真品、伪品及混杂品,在未破坏金银花样本组织结构及材质的情况下,可有效辨别金银花真伪,具有较强的优良性。
关键词: 双向位点特异性PCR 金银花 真伪鉴别