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  • 抗菌肽SMAP-29基因设计合成、表达、纯化及其杀菌活性初步研究

    作者:李晨燕

    目的通过对SMAP-29基因的改造,使其以C端融合蛋白的形式在大肠杆菌中大量表达.方法根据SMAP-29蛋白质序列,选用大肠杆菌偏爱密码子自行设计全新基因,基因克隆入pGEX-4t-1质粒,在大肠杆菌BL21中进行表达,经GsT琼脂糖FF层析柱纯化,同时作凝血酶切割,再经HPLC分离纯化,并检测重组抗菌肽SMAP-29的抗菌活性.结果设计合成的SMAP-29全新基因在GST的C端以融合蛋白的形式在大肠杆菌中得以表达,抗菌肽SMAP-29的表达量达到82mg/L,并具有很强的抗菌活性.结论通过对SMAP-29基因的改造,使得抗菌肽SMAP-29能在大肠杆菌中表达,并具有较高的表达量,为进一步做SMAP-29蛋白的功能性研究及其将来临床应用提供了实验和理论基础.

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