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  • 甲基磺酸甲酯诱发WTK1细胞tk位点突变试验方法的建立

    作者:张建清;张立实;王瑞淑

    目的: 建立WTK1细胞t k基因突变试验方法,为毒理学评价和机制的研究提供实验依据. 方法: 用标准诱变剂甲基磺酸甲酯(MMS)处理WTK1细胞,检测t k位点突变率和细胞p53基因蛋白表达水平的改变. 结果: MMS可诱导WTK1细胞t k位点突变率增加,MMS的处理剂量达到10 mgL-1时,t k位点突变率为985.2 / 10 6个细胞,并有剂量反应关系.诱发突变率约是自发突变率3~10倍. 在t k位点诱发了两种不同表型的突变集落,即正常生长突变体(t k-NG mutant)和慢生长突变体(t k-SG mutant),但以慢生长突变体为主. MMS处理后,WTK1细胞P53蛋白的表达水平增高. 结论: MMS可以诱发WTK1细胞t k位点的突变率增加,MMS处理细胞后,P53蛋白的表达水平增高,说明WTK1细胞的P53蛋白的功能尚未丧失.该方法的建立,为进一步开展t k基因突变试验,评价环境化学物的诱变性奠定了基础.

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