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LC3 Ⅱ/Ⅰ文献资料
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枸杞多糖对脊髓神经细胞辐射损伤后的保护作用研究
目的:研究枸杞多糖(LBP)对辐射损伤脊髓神经(SCN)细胞的保护作用,并观察自噬相关蛋白LC3 Ⅱ/Ⅰ表达的变化,探讨LBP对辐射损伤保护作用的机制.方法:体外培养SCN细胞,应用不同剂量(0、2、6、10 Gy)X射线辐照损伤后,采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率确定佳辐射剂量,建立辐射损伤模型.用不同浓度(15、25、40 mg/L)LBP对辐射损伤的SCN细胞进行干预后,分别采用MTT法检测细胞存活率以确定适LBP干预剂量;用佳辐射剂量和LBP干预后,采用Western blot和免疫组化法检测自噬相关蛋白LC3 Ⅱ/Ⅰ的表达.结果:X射线辐照后,SCN细胞存活率在2～10 Gy范围内随着照射剂量的增加而逐渐降低,和正常对照组比较差异均具有统计学意义(P＜0.05);MTT实验结果显示,与辐射组相比,不同浓度LBP干预后SCN细胞存活率均明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05),故确定10GyX射线照射和40 mg/L LBP干预进行后续造模.免疫组化和Westernblot检测结果均显示,与正常对照组相比,辐射组细胞的自噬相关蛋白LC3 Ⅱ/Ⅰ表达明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);与辐射组相比,LBP+辐射组细胞LC3 Ⅱ/Ⅰ蛋白表达亦明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:LBP对体外培养的脊髓神经元辐射损伤具有保护作用,可能与LBP促进自噬相关蛋白LC3 Ⅱ/Ⅰ表达有关.
