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兔皮肤中全缘千里光碱的HPLC测定
目的:建立一种兔皮肤中全缘千里光碱测定的HPLC方法.方法:采用Ⅹ-Terra RP18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(23∶77,以冰醋酸、氨水调节pH至7.1),流速0.8 mL· min-1,柱温为室温,检测波长213 nm,进样量20 μL.样品处理过程包括皮肤匀浆、液-液萃取、氮气吹干有机层、残留物复溶及进样分析.结果:皮肤中的内源性物质对测定无干扰;样品皮肤(1 cm2)中药物含量在0.525~31.5 μg范围内与其峰面积的线性关系良好(r=0.999 8,n=7);日内、日间精密度良好(RSD≤12.2%);准确度(相对回收率)为96.2%~105.0%,提取回收率为79.4%~83.7%;复溶的供试品溶液在24 h内稳定(相对回收率为95.2%~100.3%),皮肤样品冷冻-解冻循环3次测定结果稳定(相对回收率为96.2%~101.8%);皮肤中全缘千里光碱含量测定结果表明,应用12h以后全皮及角质层下皮肤中药物滞留量的大小关系为:全缘千里光碱脂质体混悬液>全缘千里光碱脂质体凝胶剂>全缘千里光碱普通凝胶剂.结论:该方法的精密度、准确度、稳定性均符合生物样本测定要求,可用于兔皮肤中全缘千里光碱的测定.