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大蒜化学成分不同测定方法比较及相关性探讨
目的:采用不同方法测定大蒜中化学成分含量并进行相关性探讨.方法:本实验参考美国药典大蒜中蒜氨酸含量测定方法,采用C18色谱柱,以乙腈-1,4-二氧六环-四氢呋喃-0.045 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(25∶2.9∶2.2∶69.9)为流动相,供试品经灭酶、衍生化处理后在337 nm下测定蒜氨酸含量;参考印度药典大蒜中蒜氨酸含量测定方法,采用C18色谱柱,以0.1％磷酸为流动相,供试品经热水灭酶处理后,直接在210 nm下测定蒜氨酸含量;采用课题组建立的大蒜中蒜氨酸含量测定方法,采用C18色谱柱,以0.04％三氟乙酸为流动相,供试品经微波灭酶处理后,直接在214 nm下测定蒜氨酸含量;参考欧洲药典和英国药典大蒜粉中大蒜辣素含量测定方法,采用C18色谱柱,以甲醇-0.1％甲酸(60∶40)为流动相,将供试品捣碎后,在254 nm下测定大蒜中大蒜辣素含量;参考中国药典大蒜中大蒜素含量测定方法,采用C18色谱柱,以甲醇-0.1％甲酸(75∶25)为流动相,将供试品捣碎、回流处理后在210 nm下测定大蒜中大蒜素含量.结果:课题组建立方法与美国药典方法测得蒜氨酸含量没有显著性差异,印度药典方法灭酶不完全,蒜氨酸测定结果偏低,欧洲药典方法合理可行,大蒜辣素测定值可反应真实情况,中国药典方法测定大蒜素的结果与多种因素相关.结论:5种方法测定的指标不同,欧盟药典和英国药典以大蒜辣素为测定指标,中国药典以大蒜素为测定指标,美国药典、印度药典和课题组自建方法都以蒜氨酸为测定指标;但方法之间仍具有一定差异,灭酶方法不同:美国药典采用蒜酶抑制剂灭酶,印度药典用热水灭酶,课题组方法采用微波灭酶;方法原理不同:美国药典采用柱前衍生化法,印度药典和课题组方法则直接测定蒜氨酸含量.
