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杂带序列分析文献资料
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聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)鉴定川贝母药材的方法优化
目的:改进中国药典2015年版中川贝母聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的鉴定方法,以防止真菌污染对结果的影响.方法:采用中国药典2015年版中PCR-RFLP方法对川贝母样品进行检测,对PCR产物电泳中出现的杂带进行了序列分析,确认来源于真菌的扩增产物.重新设计PCR-RFLP中的扩增引物,将下游引物设计在贝母与真菌序列差异较大的ITS2区域.对改进后的PCR-RFLP方法进行了验证.结果:用含新引物的PCR-RFLP鉴定时PCR产物未出现杂带,改进方法鉴定的准确性优于中国药典2015年版中给出的方法.结论:改进的PCR-RFLP方法可以对川贝母进行鉴定,同时防止了真菌污染产生的杂带对结果判断的影响.
