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  • bFGF对人α1(I)原胶原基因启动子活性的调控

    作者:万伟东;杨松林;林子豪;高春芳;王皓;伍严安

    目的 观察bFGF对人皮肤成纤维细胞增殖的影响及调控α1(I)原胶原基因序列的作用。 方法  用组织块法培养人皮肤成纤维细胞并传代,采用BrdU掺入的ELISA法,测定不同浓度的bFGF对成纤维细胞增殖的影响。构建三种人α1(I)原胶原基因5' 侧翼序列与报告基因氯霉素乙酰基转移酶(CAT)的重组质粒,用FuGENE转染试剂转染成纤维细胞,同时用p-sv-b-GAL表达质粒转染细胞作为阳性对照组,ELISA法测定经bFGF处理后成纤维细胞CAT的表达量。 结果   在体积分数2%或10%小牛血清培养条件下,bFGF加入浓度从0.25 ng/ml增至64.00 ng/ml,作用24 h后,各组细胞增殖数值之间差异有显著性意义(P<0.05)。用三种重组质粒分别转染细胞,bFGF处理24 h后,CAT相对表达量测定结果提示, bFGF组与对照组相比差异有显著性意义(P<0.05)。 结论  bFGF对人皮肤成纤维细胞增殖有抑制作用,对胶原基因启动序列具有负性调控作用,且存在剂量依赖关系。

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