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  • NHE-1反义基因磁性纳米颗粒的构建及鉴定

    作者:陈刚;刘海峰;滕小春

    目的构建NHE-1反义基因磁性纳米颗粒,探讨以氧化铁磁性纳米颗粒为载体转染NHE-1反义基因治疗肿瘤的可能性.方法应用共沉淀法制备外包葡聚糖的氧化铁磁性纳米颗粒(dextran coated iron oxide nanoparticles,DCIONP).使用透射电镜和激光粒度检测仪检测DCIONP的形态和粒径,采用琼脂糖凝胶电泳分析氧化铁磁性纳米颗粒结合NHE-1反义基因及抵抗DNaseⅠ消化的能力,采用磁场吸引的方法分析氧化铁磁性纳米颗粒携带NHE-1反义基因定向运动的能力.结果透射电镜观察显示:纳米颗粒形状不规则,颗粒内部有一氧化铁的核心.激光粒度检测仪检测证实DCIONP的平均直径在47 nm左右.结合实验的琼脂糖凝胶电泳显示,pll-DCIONP在各种质量比均有良好的DNA结合能力.DNA保护实验显示从质量比0.5∶1开始pll-DCIONP能有效保护DNA不被DNaseⅠ降解.沉淀实验证明pll-DCIONP可携带质粒DNA在外加磁场作用下在液体中定向移动.结论成功构建了NHE-1反义基因磁性纳米颗粒,该颗粒具有粒径小、稳定性高及磁靶向运动的特点.

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