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  • NT4-p53(N15)-Ant融合基因的克隆和鉴定

    作者:宋丽萍;李跃萍;邱曙东;杨广笑;王全颖

    目的 构建NT4-p53(N15)-Ant融合基因表达盒并进行序列分析.方法 应用互为模板的引物PCR技术及T载体克隆法克隆p53(N15)-Ant基因,筛选阳性克隆、酶切鉴定并测序.扩增阳性重组质粒后限制性内切酶切取p53(N15)-Ant片段连入pBV220/NT4质粒.结果 克隆了p53(N15)-Ant基因,经酶切及测序证实结果正确;重组质粒pBV220/NT4p53(N15)Ant经限制性内切酶及琼脂糖凝胶电泳,结果显示酶切片段大小和理论值一致.结论 通过分子克隆体外重组技术成功制备了含有NT4-p53(N15)-Ant表达盒的pBV220质粒,为进一步开展肿瘤的基因治疗奠定了基础.

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