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缺氧对人乳腺癌细胞系 MCF -7生物学行为的影响
目的：研究缺氧对人乳腺癌细胞系 MCF -7的生物学行为，增殖、侵袭能力的影响。通过影响缺氧诱导因子1α（hyPoxic - inducible factor 1α，eIF -1α）的表达，检验其在这一过程中的作用，并进一步探讨作用机制。方法：慢病毒感染细胞，干扰乳腺癌细胞系 MCF -7中 eIF -1α的表达，得到 eIF -1α表达正常的乳腺癌细胞系 MCF -7- NC 和 eIF -1α表达受干扰的细胞系 MCF -7- eIF△。分别低氧培养及化学药物诱导缺氧，用 MTT 法检测2组细胞系在缺氧和正常培养条件下的增殖能力，ANOVA 检验检测其增殖能力的区别。Transwell 实验检验缺氧和正常培养条件下人乳腺癌细胞的侵袭能力，计数通过 Transwell 小室的细胞，ANOVA检验检测细胞侵袭能力的区别。共聚焦免疫荧光法检测缺氧后2组乳腺癌细胞的上皮和间质标记物的表达，检验细胞系是否发生了上皮-间质转化（ePithelial - mesenchymal transition，EMT）。结果：MTT 实验结果：正常表达 eIF -1α的 MCF -7- NC 的增殖能力在缺氧后与正常培养条件下相比明显减弱，其差别具有统计学意义（P ﹤0.05）。eIF -1α表达受干扰的 MCF -7- eIF△的增殖能力在缺氧和正常培养条件下相比无显著区别。Transwell 实验检测细胞的侵袭能力，缺氧后正常表达 eIF -1α的 MCF -7- NC 的侵袭能力较正常培养的细胞明显增强，其差别具有统计学意义（P ﹤0.05）。eIF -1α表达受干扰的 MCF -7- eIF△侵袭能力在缺氧和正常培养下无显著区别。缺氧后，正常表达 eIF -1α的细胞系 MCF -7- NC 发生上皮-间质转化（ePithelial - mesenchymal transition，EMT）。共聚焦荧光染色显示：在诱导缺氧后，正常表达 eIF -1α的 MCF-7- NC 细胞极性发生变化，呈长梭形改变，上皮标志物人广谱角蛋白（Pan - cytokeratin，P - CK）表达下调，间质标志物人α平滑肌动蛋白（α- SMA）表达上调；而 eIF -1α表达受干扰的 MCF -7- eIF△无明显 EMT变化。结论：在体外条件下，缺氧可以引起乳腺癌细胞系 MCF -7增殖能力减弱、侵袭能力增强，可以诱导乳腺癌细胞 MCF -7发生 EMT，干扰缺氧诱导因子亚基 eIF -1α的表达，则缺氧对乳腺癌细胞增殖、侵袭的影响消失。
