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  • MTT比色法与ELISA法测定rhEPO体外生物学活性比较

    作者:韩蕾;韩为跃

    红细胞生成素(erythropoietin,EPO)是人体内调控红系祖细胞的重要造血生长因子,它能刺激红系前体细胞的分化、增殖及成熟.重组人红细胞生成素(rhEPO)是运用基因工程方法,把人EPO基因转入CHO细胞内进行分泌表达,再经过纯化工艺获得的活性蛋白.rhEPO在治疗慢性肾性贫血及肾功能衰竭方面具有良好的疗效.rhEPO生物活性测定方法分体外法与体内法,现就两种体外测定rhEPO生物活性方法进行研究与比较.MTT比色法,运用四甲基偶氮唑盐(MTT)在活细胞线粒体琥珀酸脱氢酶作用下可被还原成蓝紫色结晶-甲形成量与细胞增殖程度成正比,从而通过rhEPO依赖株UT-7形成的甲量来定量测定rhEPO活性.双抗夹心ELISA法,用抗体包被固相载体后加rhEP0标准品与样品,使相应抗原与固相抗体结合后加入酶标抗体,后再与该酶的底物反应生成有色物质,通过标准曲线精确测得rhEPO样品生物活性单位.

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