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非凝集型抗体文献资料
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抗人红细胞膜抗原非凝集型单克隆抗体的研制及特性鉴定
目的:制备抗人红细胞膜抗原的非凝集型单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性.方法: 应用杂交瘤技术, 以人O型红细胞膜抗原免疫BALB/c小鼠.取免疫小鼠的脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合, 用聚凝胺试管法筛选识别红细胞表面共同抗原的抗体, 玻片凝集实验剔除凝集型抗体(完全抗体), 再将分泌非凝集型mAb(不完全抗体)的杂交瘤细胞株用有限稀释法克隆化3次.对杂交瘤细胞的稳定性和mAb的特性进行鉴定.结果: 获得1株可稳定分泌mAb的杂交瘤细胞2E8.mAb 2E8为IgG1类, 可特异性地识别红细胞膜上的H抗原, 没有种属交叉血凝反应.杂交瘤细胞的培养上清与人的A、 B、 AB和O型红细胞均能产生强凝集, 凝集效价为1: 1 024, 腹水mAb的凝集效价达到1: 64×106.mAb的亲和力用凝集试验检测, 出现血凝的时间为7 s, 3 min以内凝块>1 mm.结论: 成功地制备了针对红细胞膜H抗原的非凝集性mAb, 此mAb的凝集效价、相对亲和力及特异性均较良好, 为构建双特异性抗体奠定了基础.