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人3型腺病毒载体文献资料
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运用表位嵌合型3型腺病毒载体制备肠道病毒71型单克隆抗体
目的 制备针对肠道病毒71型(EV71)的单克隆抗体(mAb).方法 将六邻体中同时嵌入EV71 SP55与SP70两个中和表位的重组人3型腺病毒作为免疫原免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备mAb.用病毒微量中和实验、间接ELISA、Westernblot法和直接免疫荧光染色法进行鉴定.结果 获得了4株分泌EV71特异性mAb的杂交瘤细胞,D2C9、2C4、I2G2、I12C3,其中D2C9株腹水间接ELISA实验效价为1∶8000000,其余3株为1∶500 000;Western blot法和ELISA结果表明4株mAb均识别EV71病毒VP1蛋白.D2C9针对SP70表位,2C4、I12C3、I2G2针对SP55表位;直接免疫荧光实验结果显示4株mAb均能与EV71特异性结合,而与柯萨奇病毒16型(CoxA16)不结合.结论 获得了对EV71亲和力高、特异性好并且与CoxA16无交叉反应的mAb.
