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  • 鸡IL-2基因的扩增、表达及生物学活性鉴定

    作者:郑玉姝;赵朴;赵宏坤

    目的:扩增鸡IL-2基因,并在大肠杆菌中表达及活性鉴定.方法:从ConA激活的AA肉鸡脾淋巴细胞中提取mRNA,以RT-PCR法扩增鸡IL-2 cDNA,将其克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,构建重组质粒pGEX-IL-2.以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达.并用淋巴细胞增殖试验及Western blot检测表达产物的生物学活性.结果:以重组质粒转化大肠杆菌经IPTG诱导后,经SDS-PAGE后薄层扫描分析证实,融合表达产物GST-IL-2表达量占表达菌菌体总蛋白的30.8%.Western blot分析表明,在相对分子质量(Mr)为42 000处有一条特异性的带.经淋巴细胞增殖试验证实,该表达产物可明显增强淋巴细胞增殖.结论:鸡IL-2基因在大肠杆菌中获得了高效表达,表达产物具有良好的生物学活性.

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